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分享使用人elisa試劑盒的詳細步驟

發布時間: 2023-04-18  點擊次數: 2099次
  ELISA(酶聯免疫吸附實驗)是一種廣泛用于生物醫學研究和臨床診斷的技術。人elisa試劑盒是一套預先包裝好的組件,用于檢測特定蛋白質或其他分子在樣本中的存在量。下面是使用人elisa試劑盒的詳細步驟:
 

 

  步驟1:收集樣本
  首先需要收集待測試的樣本。這可以是血液、尿液、唾液等生物樣本。將樣本放入試管中,并將其標記以避免與其他樣本混淆。
 
  步驟2:稀釋樣本
  對于某些樣本,如血清和血漿,需要進行稀釋。這是為了確保樣本中含有足夠低的蛋白質濃度,以避免在后續步驟中出現假陽性結果。通常會用緩沖液稀釋樣品,使得樣品能夠被人elisa試劑盒所檢測。
 
  步驟3:裝載試板
  將96孔板插入孔板支架中,并將每個孔加入要測試的樣本或標準品。每個孔位都需要添加適量的綁定抗體,并進行孵育反應。
 
  步驟4:孵育
  將孔板放入溫度控制器中,一般會將其孵育30-60分鐘,以便樣本中的蛋白質與綁定抗體結合。在此過程中,可以通過輕輕震動微板使物質更充分地混合。
 
  步驟5:洗滌
  使用緩沖液或PBS洗滌孔板,去除不結合的物質。通常需要洗滌2-5次,以確保所有不結合的物質都已被清除。
 
  步驟6:加入檢測抗體
  將檢測抗體添加到每個孔位中,并進行孵育反應。此抗體將與之前的綁定抗體結合,并形成一個復合物。這個復合物是將要檢測的蛋白質、抗原或其他生物分子的檢測目標。
 
  步驟7:再次洗滌
  使用緩沖液或PBS洗滌孔板,去除不結合的物質。
 
  步驟8:加入底物
  將底物HRP(過氧化物酶)添加到每個孔位中,并進行孵育反應。復合物將與底物發生反應,產生顏色變化的信號。
 
  步驟9:終止反應
  在可見的顏色出現之前,及時添加停止反應的緩沖液。這會阻止進一步產生顏色,并穩定復合物的信號。
 
  步驟10:測量信號
  使用讀數器或多光譜分析儀測量每個孔位的吸光度。吸光度與蛋白質、抗原或其他生物分子的存在量成正比。根據標準曲線計算樣品中蛋白質的含量。
 
  人elisa試劑盒是一種用于檢測特定生物分子的快速、靈敏和可靠的方法。通過遵循以上步驟,可以使用人elisa試劑盒進行高質量的實驗并得到準確的結果。




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